El factor de transcripción nuclear Y subunidad ? (NFYA) se ha reportado que juega roles funcionales en una variedad de malignidades, mientras que su función mecánica precisa en el contexto del progreso del cáncer colorrectal (CRC) aún no ha sido establecida. Se utilizaron las bases de datos TIMER2, UALCAN y Kaplan-Meier Plotter para evaluar la expresión de NFYA y medir su relevancia pronóstica en CRC. Determinar la expresión de NFYA y glutatión peroxidasa 4 (GPX4) en líneas celulares (NCM460, DLD1 y HCT116) y muestras clínicas utilizando PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) y ensayo de inmunoblot occidental. La evaluación de la viabilidad celular, proliferación y migración involucró el ensayo MTT, tinción EdU, formación de colonias y citometría de flujo.
El contenido de malondialdehído (MDA) y los niveles de especies reactivas de oxígeno lipídicas (ROS) se evaluaron utilizando kits especializados. Los cambios ultraestructurales mitocondriales se observaron mediante microscopía electrónica de transmisión (TEM). La regulación trascricional de GPX4 por NFYA se investigó a través de ensayos de reportero luciferasa y experimentos de inmunoprecipitación cromatínica (ChIP). Se expresaron niveles más altos de NFYA en células CRC y muestras clínicas, y la sobreexpresión de este objetivo estuvo asociada con un pronóstico peor para pacientes con CRC.
In vitro, la inhibición de la expresión de NFYA perjudicó la actividad proliferativa y migratoria de las células CRC. Se encontró que NFYA funciona en parte al unirse a la región promotora de GPX4 y activar la transcripción, lo que lleva a un aumento en los niveles de GPX4 y consecuentemente reducciones en los niveles de peróxido lipídico y ferropótesis. NFYA se une a la región promotor de GPX4, regulando la transcripción de GPX4. En el experimento de recuperación, la inhibición de la ferropótesis inducida por NFYA en las células fue revertida por GPX4.
De manera correspondiente, la ferropótesis causada por la supresión de GPX4 puede ser revertida por NFYA.
Por lo tanto, NFYA es un objetivo prometedor para terapias dirigidas a tratar CRC. NFYA es un regulador clave de la resistencia a la ferropótesis en CRC mientras también proporciona insights mecánicos directos sobre la función oncogénica que este proteína juega en estas células tumorales. NFYA/GPX4 puede ser una de las razones subyacentes para el crecimiento maligno de las células CRC.
Inicia sesión o regístrate para acceder al texto completo
¡Aún no hay comentarios. Sé el primero en comentar!