No fenotipos en ratones knockout de Ttc22

El gen TTC22 codifica una proteína que contiene siete repeticiones de tetratricopeptidio (TPR), las cuales mediadas interacciones proteína-proteína como choferes moleculares. Anteriormente reportamos que el nivel del transcripto variante 1 de TTC22 (TTC22v1) estaba downregulado en adenocarcinoma colorrectal humano (COAD) y que TTC22 upregulaba la expresión de WTAP y SNAI1 mediada por m6A a través de la interacción TTC22-RPL4 y promovía posteriormente la metástasis del COAD.

Por lo tanto, se utilizó un modelo comercial de ratón C57BL/6N en el que el exón 2&3 del Ttc22 codificando el dominio TPR4 (equivalente al dominio TTC22 TPR3 humano) fue eliminado mediante CRISPR-Cas9 para evaluar la contribución de Ttc22 al desarrollo de los ratones y COAD. Para determinar el estado de expresión del Ttc22 en ratones knockout de Ttc22, se preparó un anticuerpo policlonal contra la proteína de Ttc22 del ratón, que podía ligarse tanto a Ttc22 tipo salvaje como a las proteínas Ttc22 con el TPR4 eliminado sobreexpresadas en células HEK293T, según el análisis por Western blot. Se detectaron proteínas de Ttc22 en muestras de tejido colónico de ratones tipo salvaje y hemi-knockout (Ttc22 -/+) pero no en las de ratones completamente knockout (Ttc22-/-). Desafortunadamente, los resultados de la observación a largo plazo demostraron que el knockout de Ttc22 (KO, incluyendo Ttc22-/+ o Ttc22-/-) no afectó el peso corporal, desarrollo, fertilidad ni la incidencia espontánea de tumores en ratones machos y hembras.

No se observaron diferencias en la incidencia de COAD inducida por AOM/DSS entre estos grupos de ratones, aunque la eliminación del Ttc22 resultó parcialmente en la upregulación de genes relacionados con la respuesta adaptativa del huésped a la inflamación en la mucosa colónica.

En conclusión, no se indujeron fenotipos por inactivación de Ttc22 en ratones C57BL/6N. HighlightsO_LIKnockout de los exones 2 y 3 del gen Ttc22 interrumpe completamente la expresión génica. C_LIO_LIKnockout de Ttc22 no afecta el desarrollo de los ratones C57BL. C_LIO_LIKnockout de Ttc22 no afecta la inducción de cáncer colorrectal en ratones por AOM/DSS.

C_LI