La producción a escala clínica de células TCR-T durante 10 días utilizando IL-2/7/15 y TGF-β promueve tempranamente fenotipos de memoria y similares a células residentes en los tejidos, y una robusta actividad antitumoral in vitro.

La terapia celular adoptiva (ACT) que utiliza células T con receptores de células T modificados (TCR-T) es una estrategia prometedora para el tratamiento de tumores sólidos. Un factor que influye en la eficacia de la ACT es el tipo de células T utilizadas, siendo las células T que presentan fenotipos más jóvenes, menos diferenciados o residentes en los tejidos, las que se asocian con una mayor actividad antitumoral. Nuestro objetivo fue desarrollar un protocolo rápido a escala clínica para generar células TCR-T más jóvenes y potentes para la terapia. Las células PBMC derivadas del paciente se estimularon, se enriquecieron con CD8+ y se transfectaron retroviralmente para expresar TCR dirigidos a KRAS G12D, y se expandieron durante 10 días en presencia de una nueva combinación de citocinas (CKT) que contenía IL-2, IL-7, IL-15 y TGF-β.

Se evaluó el impacto de la CKT en el fenotipo, la función efectora y la actividad antitumoral in vitro, y se comparó con las células TCR-T fabricadas con IL-2. Este proceso se adaptó posteriormente para la fabricación a escala clínica. Las células TCR-T generadas con CKT mostraron una mayor frecuencia de células T de memoria temprana (Tn/scm) y células T similares a las residentes en los tejidos (Trm), con una expresión reducida de KLRG1 en comparación con las células TCR-T fabricadas con IL-2. Las células TCR-T fabricadas con CKT demostraron una mayor regulación de 4-1BB, producción de IFN-γ, TNF y granzima B (GZMB), y una mayor capacidad de eliminación de líneas celulares de cáncer de páncreas y cáncer colorrectal en cocultivos de tumores en 2D y 3D.

Las ejecuciones de ingeniería a escala clínica produjeron 3,30 y 6,15 x 109 células en total, que mostraron atributos fenotípicos y funcionales similares a los observados en los estudios a pequeña escala. Nuestro nuevo protocolo de fabricación de células TCR-T de 10 días que utiliza IL-2, IL-7, IL-15 y TGF-β genera células TCR-T caracterizadas por marcadores distintos de memoria y residencia tisular, como CCR7, CD103 y CD49a, y funciones efectoras potentes con el potencial de mejorar la eficacia de la terapia celular adoptiva.