La modulación directa de LILRB4 (ILT3) mediante pequeñas moléculas restaura la inmunidad antitumoral in vivo y en células derivadas de pacientes.

La modulación mediante pequeñas moléculas de los puntos de control inmunitarios mieloides supresores sigue siendo un gran desafío en la inmunoterapia del cáncer, especialmente para los receptores no enzimáticos que carecen de sitios activos convencionales susceptibles a fármacos. El receptor similar a la inmunoglobulina de los leucocitos B4 (LILRB4/ILT3) es un punto de control mieloide inmunosupresor implicado en la evasión inmunitaria tumoral, la disfunción de las células T y la resistencia a la inmunoterapia tanto en neoplasias sólidas como hematológicas. Aquí, presentamos el descubrimiento y la caracterización de GL-4512, un modulador directo de LILRB4 mediante pequeñas moléculas, identificado mediante una plataforma de cribado basada en Dianthus que mide el cambio de intensidad relacionado con la temperatura (TRIC). Estudios biofísicos ortogonales, que incluyen termoforesis a microescala, resonancia de plasmones superficiales y ensayos de desplazamiento térmico celular, confirmaron la interacción directa con el objetivo con una afinidad nanomolar.

Amplias simulaciones de dinámica molecular a microsegundos, combinadas con mutagénesis dirigida al sitio, identificaron una bolsa ligable previamente no reconocida dentro del dominio extracelular flexible de LILRB4. A nivel funcional, GL-4512 interrumpió el eje de señalización inmunosupresor LILRB4-SCG2 y suprimió la señalización descendente de SHP1/SHP2 y STAT3. En sistemas de cocultivo de cáncer colorrectal y leucemia mieloide aguda derivados de pacientes, la inhibición farmacológica de LILRB4 restauró la actividad inmunitaria antitumoral, mejoró la producción de IFN-γ e IL-2, aumentó la activación de las células T citotóxicas y redujo la viabilidad de las células tumorales.

Además, GL-4512 demostró tener propiedades farmacocinéticas y de seguridad favorables que respaldan la administración oral in vivo. En tumores colorrectales CT26 sinérgicos en animales inmunocompetentes, el tratamiento oral una vez al día suprimió significativamente el crecimiento tumoral y mejoró la activación inmunitaria intratumoral. En conjunto, estos hallazgos establecen a LILRB4 como un objetivo viable para la modulación inmunitaria directa mediante pequeñas moléculas y respaldan el tratamiento terapéutico de los puntos de control inmunitarios mieloides supresores en el cáncer mediante modalidades no biológicas.