La decocción Xianlian Jiedu (XLJDD) es una formulación tradicional de la medicina china que se utiliza habitualmente en el tratamiento clínico del cáncer colorrectal (CCR).
Sin embargo, los mecanismos subyacentes de sus efectos terapéuticos aún no se han dilucidado por completo.
El presente estudio tuvo como objetivo investigar los objetivos moleculares y las vías de señalización mediante las cuales el compuesto de la medicina tradicional china XLJDD ejerce efectos terapéuticos sobre el CCR. Se preparó suero que contenía el fármaco XLJDD y se aplicó a líneas celulares de CCR (HCT116 y HT29), y se determinó la concentración óptima mediante el ensayo CCK-8. La apoptosis se evaluó mediante tinción con Hoechst 33342, ensayo TUNEL, ensayo JC-1 y citometría de flujo con Annexin V-FITC/PI, respectivamente. Los niveles de secreción de S1P en los sobrenadantes del cultivo celular se midieron mediante ELISA.
Se establecieron modelos de tumores murinos subcutáneos CT26 y se administró por vía intragástrica la decocción preparada de XLJDD. Se controlaron las curvas de crecimiento tumoral y se evaluaron los pesos tumorales finales. Los tejidos tumorales se tiñeron con hematoxilina y eosina (H&E) para observar los cambios histopatológicos, mientras que la expresión de las proteínas Ki-67, Bcl-2 y Caspase-3 se evaluó mediante inmunohistoquímica (IHQ). El análisis de ARN-seq masivo, junto con los análisis de transcriptómica y enriquecimiento GO/KEGG, reveló alteraciones en las vías de señalización clave, que se validaron posteriormente a nivel de proteínas mediante Western blot.
En conjunto, estos experimentos dilucidaron que XLJDD ejerce efectos anticáncer colorrectal mediante la regulación de las vías de señalización de MAPK y las vías de señalización apoptóticas relacionadas. El suero que contiene el fármaco XLJDD suprimió significativamente la viabilidad de las células de CCR y promovió la apoptosis de forma dependiente de la dosis.
Los resultados del ELISA mostraron que el suero que contiene el fármaco XLJDD redujo los niveles de esfingosina-1-fosfato (S1P) en los sobrenadantes del cultivo celular de CCR. Los experimentos in vivo demostraron que los ratones portadores de tumores tratados con XLJDD presentaban un retraso en el crecimiento tumoral, una reducción del peso tumoral y una mejora de la morfología del tejido tumoral.
Además, XLJDD suprimió la actividad pro-tumorigénica de S1P de forma dependiente de la dosis. El análisis de inmunohistoquímica y Western blot indicó que XLJDD redujo la expresión de Ki-67 y Bcl-2, promovió la activación de Caspase-3 e inhibió la vía de señalización JNK/p38 MAPK. El análisis de transcriptómica y enriquecimiento de vías de ARN-seq masivo confirmó además que XLJDD suprimió la progresión tumoral mediante la regulación de la vía JNK/p38 MAPK mediada por S1P, proporcionando evidencia experimental que respalda su aplicación clínica. XLJDD suprime el desarrollo y la progresión del CCR al reducir los niveles de S1P, modular la vía de señalización JNK/p38 MAPK y mejorar la apoptosis de las células tumorales.
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