Afinación y caracterización de la maduración del nuevo anticuerpo monoclonal (mAb) PB-223 dirigido contra los O-glicanos específicos del cáncer que terminan en α(2,6) ácidos siálicos.

Antecedentes: Mejorar la afinidad de unión de los anticuerpos monoclonales (AcM) tiene el potencial de mejorar su eficacia terapéutica. En este estudio, generamos un nuevo AcM, PB-223, mediante la maduración de afinidad del anticuerpo parental NEO-102. NEO-102 (ensituximab) es un AcM quimérico humano IgG1 que se dirige a una variante glicosilada específica del cáncer de MUC5AC expresada en los cánceres de colon y páncreas, al tiempo que preserva los tejidos sanos.

En un estudio clínico de fase 2 que involucró a pacientes con cáncer colorrectal avanzado y refractario, muy pretratados, NEO-102, como monoterapia, mostró una eficacia modesta. Métodos: Modificamos las regiones VH y VL de NEO-102 mediante la maduración de afinidad para mejorar la unión al antígeno, preservando al mismo tiempo la especificidad del objetivo. El clon optimizado, PB-223, se evaluó para mejorar la unión mediante Biacore T200, citometría de flujo e inmunohistoquímica (IHQ). El antígeno específico de PB-223 se descubrió utilizando un array de O-glicanos.

Un ensayo de internalización evaluó la capacidad de PB-223 para ser internalizado en líneas celulares de cáncer humano que expresan su antígeno diana. Resultados: El análisis realizado con el software de evaluación Biacore T200 (versión 3.2) reveló que PB-223 exhibe una constante de disociación de equilibrio (KD) 4,55 veces menor en comparación con NEO-102 hacia la mucina bovina submaxilar humana recombinante (BSM), una proteína rica en O-glicanos. PB-223 tiene una unión mejorada a las líneas celulares de cáncer humano reconocidas por NEO-102 utilizando la citometría de flujo. El análisis del array de O-glicanos identificó los O-glicanos que terminan con ácidos siálicos α(2,6), incluidos los O-glicanos centrales 2 y los glicanos sTn, expresados por las líneas celulares de cáncer humano que reaccionan con PB-223 en la citometría de flujo, como el epítopo de unión específico de PB-223. El análisis de IHQ de los tejidos tumorales humanos mostró que PB-223 no se une a los tejidos sanos probados en este estudio, y que demuestra un aumento en el número de tejidos cancerosos reconocidos y en la puntuación de IHQ en comparación con NEO-102.

PB-223 se internaliza en una línea celular de cáncer humano que expresa su antígeno diana. Conclusiones: PB-223 podría utilizarse potencialmente como un componente de direccionamiento para terapias basadas en anticuerpos, incluidos los conjugados anticuerpo-fármaco (ADC), los anticuerpos bispecíficos, los constructos que activan el sistema inmunitario y los radiofármacos, para el tratamiento de los cánceres humanos que expresan O-glicanos que terminan con ácidos siálicos α(2,6), incluidos los O-glicanos centrales 2 y los glicanos sTn.