Nanocables de ADN programables que median la dispersión y la localización en el ensamblaje catalítico de horquillas para la detección y la obtención de imágenes de alta resolución de microARN.

El perfilado preciso de los microARN (miARN) a menudo se ve limitado por el importante ruido de fondo de la amplificación de ADN convencional sin enzimas. En el presente estudio, desarrollamos una plataforma de ensamblaje catalítico de horquillas de ADN mediada por nanocables de ADN 1D (DL-CHA) para la detección altamente sensible de miARN. Metodológicamente, las horquillas sensibles se aíslan físicamente en andamios de nanocables dispersos espacialmente para suprimir rigurosamente las interacciones independientes del objetivo. Tras el reconocimiento específico de miR-21, se desencadena una cascada pseudo-intramolecular, que une dinámicamente los andamios en una escalera de ADN altamente fluorescente.

Como resultado, esta plataforma DL-CHA proporciona una relación señal/ruido excepcional de 12,4, un amplio rango lineal de 0,05 a 250 nM y un límite de detección ultrasensible de 50 pM sin necesidad de enzimas exógenas.

Además, la rígida arquitectura de nanocables garantiza una robusta resistencia a las nucleasas y permite una internalización altamente eficiente y sin transfección para la obtención de imágenes in situ de los miARN endógenos en células vivas. Clínicamente, la plataforma discriminó con precisión a los pacientes con cáncer colorrectal de los controles sanos utilizando biopsias líquidas no invasivas de suero humano. Este enfoque ofrece una herramienta molecular robusta y de bajo ruido de fondo para el diagnóstico preciso del cáncer.