Un fibroblasto RGS5-positivo y un eje WNT-like epitelial TGFB en la metástasis hepática del cáncer colorrectal, replicados en una cohorte pareada independiente.

Antecedentes: La metástasis hepática del cáncer colorrectal se acompaña de una remodelación estromal coordinada, pero no se ha investigado con frecuencia qué estados de fibroblastos y células epiteliales malignas están acoplados, ni si dicho acoplamiento se mantiene fuera del conjunto de datos en el que se identificó. Métodos: Se analizaron tumores primarios y metástasis hepáticas de seis pacientes mediante secuenciación de ARN de una sola célula, con identificación de células malignas basada en el número de copias, inferencia de trayectorias, comunicación célula-célula y modelado ligando-receptor, y transcriptómica espacial de tres secciones metastásicas. Se obtuvieron tinciones proteicas de un recurso de tejidos independiente.

A continuación, se repitió cada paso en una segunda cohorte independiente de cinco pacientes y dos secciones metastásicas adicionales, con identidades celulares fijadas mediante transferencia de los datos de descubrimiento en lugar de un nuevo ajuste. Resultados: Un estado de fibroblasto/pericitos similar positivo para RGS5 (F2) y un estado epitelial maligno similar a WNT (C2) se encontraron enriquecidos en las metástasis y ocuparon posiciones tardías en la trayectoria. El análisis de comunicación identificó un programa direccional de F2 a C2, con el factor de crecimiento transformante beta como la vía de mayor rango y su receptor TGFBR2 enriquecido en C2. Los datos espaciales ubicaron ambos estados en los mismos vecindarios. Los genes centrales del programa fueron TPT1, SLC1A5, SOX4 y TSC22D1, y la tinción proteica fue mayor en el tumor que en el colon normal para los tres con datos disponibles.

En la cohorte independiente, los mismos estados reaparecieron: F2 se enriqueció en las metástasis (Ro/E 1,22 frente a 0,52; 32% frente a 14% de los fibroblastos), las células similares a C2 fueron el estado epitelial más enriquecido en las metástasis (1,10 frente a 0,86), el 92% de las células que los propios autores de la cohorte denominaron fibroblastos positivos para MCAM se asignaron a F2, y F2 fue nuevamente el principal emisor de TGFB hacia el epitelio similar a C2 en ambos sitios. Conclusiones: Un eje direccional de TGFB desde un estado de fibroblastos positivo para RGS5 hacia un estado epitelial similar a WNT es una característica reproducible de la metástasis hepática del cáncer colorrectal, más que una propiedad de un único conjunto de datos. Su expresión espacial varía entre las secciones, lo que limita la posibilidad de afirmar que ambos estados están fuertemente colocalizados.