Diseño, síntesis y evaluación in vitro preliminar de nuevas hidrazonas de tolmetina contra el cáncer de colon.

El presente estudio describe el diseño y la síntesis de veinte nuevas tolmetin-hidrazonas (3a-t). Las estructuras de los compuestos sintetizados se elucidaron utilizando las técnicas de espectroscopía FT-IR, RMN de 1H, RMN de 13C y HR-MS (ESI+). Se evaluó el potencial citotóxico de todos los compuestos sintetizados frente a células de cáncer de colon humano HCT-116 y fibroblastos normales de colon CCD-18Co utilizando el ensayo colorimétrico CCK-8. Basándose en sus valores de IC50 e índice de selectividad (SI), se seleccionaron 2-[1-metil-5-(4-metilbenzoil)-1H-pirrol-2-il]-N'-(tiofen-2-ilmetileno) acetohidrazida (3h) (IC50 = 10,93 ± 0,07 μM / SI = 4,01) y N'-(2,3-diclorobencilideno)-2-[1-metil-5-(4-metilbenzoil)-1H-pirrol-2-il] acetohidrazida (3q) (IC50 = 21,41 ± 0,13 μM / SI = 2,76) como los compuestos más activos para realizar investigaciones mecanicistas adicionales.

Para dilucidar los mecanismos citotóxicos subyacentes, se realizaron la evaluación del potencial de membrana mitocondrial (MMP) mediante tinción con JC-1, la detección de apoptosis mediante tinción doble con Annexin V/PI y la evaluación cuantitativa de la actividad de la enzima COX-2 y los niveles de PGE2 en células HCT-116. El compuesto 3h indujo selectivamente la despolarización del potencial de membrana mitocondrial, desencadenó la apoptosis, exhibió inhibición de la COX-2 dependiente de la dosis y disminuyó los niveles de prostaglandinas.

Además, se realizaron simulaciones detalladas de acoplamiento molecular de todos los compuestos frente a las enzimas COX-1 humana (ID PDB: 6Y3C) y COX-2 (ID PDB: 5KIR) para calcular sus energías de unión e identificar la base estructural de su selectividad. El análisis in silico reveló orientaciones de unión favorables para el compuesto 3h (-10,1 kcal/mol), incluidas interacciones de enlace de hidrógeno con residuos clave del sitio activo y de compuerta, como HIS90. En conjunto, el compuesto 3h exhibe actividad antitumoral selectiva y representa un prometedor compuesto de partida para el desarrollo de agentes antitumorales dirigidos a la COX-2.