UBR4 aumenta la eficacia del anticuerpo anti-EGFR facilitando la endocitosis dependiente de clatrina del EGFR en el cáncer colorrectal.

Los anticuerpos monoclonales antireceptor de factor de crecimiento epidérmico (EGFR) tratan eficazmente el cáncer colorrectal metastásico (CRC); sin embargo, predecir la respuesta a estas terapias sigue siendo desafiante. Aquí, buscamos identificar los reguladores clave de la internalización del EGFR como biomarcadores predictivos para la terapia con anticuerpos monoclonales anti-EGFR en CRC. Se trataron líneas celulares de CRC con cetuximab y se analizó la internalización del EGFR mediante knockdowns por siRNA, inhibidores y análisis proteómicos. A través de inmunoprecipitación y espectrometría de masa tandem se identificaron las proteínas clave que mediaban la internalización del EGFR unido a cetuximab y se validaron utilizando RT-PCR, co-inmunoprecipitación, inmuno-fluorescencia, ensayos de viabilidad celular y apoptosis.

Se realizó inmunohistoquímica para correlacionar los hallazgos con los resultados clínicos. La endocitosis dependiente de clatrina mediada por Cadena Pesada de Clatrino fue la principal vía de internalización del EGFR unido a cetuximab. El knockdown de genes de endocitosis independientes de clatrina o la inhibición de macropinocitosis no afectaron la internalización del EGFR unido a cetuximab. Ubiquitin Protein Ligase E3 Component N-Recognin 4 (UBR4) se identificó como mediador crítico de la degradación del EGFR.

El knockdown de UBR4 promovió el reciclaje del EGFR, aumentó la proliferación celular y redujo la apoptosis en respuesta a cetuximab. La alta expresión de UBR4 en tejidos de CRC se correlacionó con mejores respuestas y mayor supervivencia sin progresión en pacientes tratados con terapia anti-EGFR. UBR4 promueve la degradación del EGFR dependiente de clatrina, mejorando la eficacia terapéutica anti-EGFR y puede servir como biomarcador predictivo en CRC metastásico.