El oncogen KRAS, central en la señalización celular a través de los caminos MAPK y PI3K-AKT, es un impulsoador notorio del cáncer que se activa con frecuencia en carcinomas pancreáticos, colorrectales y pulmonares. La regulación de la expresión del oncogen KRAS humano es importante debido a su papel capital en el crecimiento celular, proliferación y supervivencia. La misregulación de su expresión contribuye directamente al desarrollo y progresión de múltiples tipos de cáncer. En estudios previos, los elementos G-cuádruples tanto en la promotor como en las regiones 5' -UTR han mostrado jugar roles importantes en la expresión del KRAS, particularmente cuando estos elementos G4 interactúan con el proteína reguladora hnRNPA1.
En este estudio, revelamos que también se modula la expresión del KRAS a nivel post-transcripcional mediante la formación de cuádruples giroplexos de ARN (rG4) situados en la región no codificante 5' (5' UTR) del mRNA. Se llevaron a cabo estudios biofísicos y de unión para explorar la interacción. A través de la calórimetría isotérmica de titulación (ITC), cuantificamos una fuerte afinidad de unión entre el dominio UP1 de hnRNPA1 y segmentos cortos de ARN capaces de adoptar diferentes plegamientos G-cuádruples. La interacción de unión se caracteriza por un cambio favorable en la energía libre de Gibbs en el rango de {Delta}G {approx} -32 a -34 kJ/mol, sugiriendo una asociación específica y energéticamente favorable.
La espectroscopía de resonancia magnética nuclear 1D y 2D 1H-15N HSQC reveló cambios pronunciados en los desplazamientos químicos de residuos tanto en las dos motivos de reconocimiento de ARN (RRMs) del UP1, significando contacto directo con la estructura rG4.
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