Pyra-Metho-Carnil suprime la infiltración de macrófagos asociada a CD73 en el cáncer colorrectal con mutación en KRAS.

Anteriormente, informamos que Pyra-Metho-Carnil (PMC) suprime la diferenciación de macrófagos en cocultivos con tumores de ratón con mutación (mt) en el gen Kirsten (KRAS). En este estudio, utilizamos proteómica integrativa e identificamos una proteína de membrana y exosómica regulada por KRAS, la 5'-nucleotidasa ecto (NT5E)/CD73, como un candidato clave que relaciona la señalización de KRAS con la remodelación del microambiente inmunitario tumoral (TIME) asociado a macrófagos. Investigamos si PMC modula las vías asociadas a CD73 durante la diferenciación de macrófagos. Las células THP-1 se diferenciaron con 12-O-tetradecanilforbol-13-acetato (PMA) y se trataron con PMC o un inhibidor de CD73 (CD73i).

Se realizaron ensayos de cocultivo tridimensional (3D) utilizando esferoides HKe3 de tipo salvaje (wt) KRAS o HKe3 con KRAS mutado (mt). La infiltración de macrófagos en los esferoides se evaluó mediante imagenología de células vivas e inmunohistoquímica (IHC) de secciones de esferoides en cocultivo. Utilizando muestras clínicas de cáncer colorrectal (CRC), se examinó la colocalización de células tumorales CD73+ y macrófagos CD68+. La IHC de las secciones de esferoides en cocultivo reveló que el tratamiento con PMC redujo la infiltración de macrófagos derivados de THP-1 en los esferoides con KRAS mutado (mt).

Cabe destacar que, si bien el CD73i reprodujo solo el efecto sobre la infiltración de macrófagos, PMC demostró un efecto antitumoral más completo al suprimir tanto la infiltración mediada por CD73 como la proliferación directa de las células tumorales. El análisis de tejidos de CRC con KRAS mutado (mt) reveló una agrupación significativa de células tumorales CD73+ y macrófagos CD68+ específicamente en los frentes invasivos. En contraste, dicha infiltración fue mínima en las regiones no invasivas o en los tejidos con KRAS de tipo salvaje (wt).

Estos hallazgos sugieren que PMC suprime la infiltración de macrófagos y promueve la reprogramación de TIME a través de mecanismos asociados con la regulación de CD73.

Por lo tanto, al dirigirse al crecimiento tumoral y a la evasión inmune, PMC ofrece un valor terapéutico superior en comparación con el CD73i convencional en el CRC con KRAS mutado (mt), donde la expresión de CD73 se correlaciona con la agrupación clínica de macrófagos.