Nueva generación de células CAR-T dirigidas contra la mesotelina que secretan scFv anti-PD-L1 para una inmunoterapia potente contra organoides de cáncer colorrectal derivados de pacientes y cultivados en 3D.

Las terapias con células CAR-T (células T con receptor quimérico de antígeno) han revolucionado el panorama del tratamiento del cáncer, especialmente en las neoplasias hematológicas.

Sin embargo, su aplicación exitosa en tumores sólidos sigue limitada por varias barreras, incluido el microambiente tumoral inmunosupresor y la toxicidad específica del tumor/fuera del tumor. Una estrategia prometedora para mejorar la eficacia de las células CAR-T es la selección racional de antígenos específicos del tumor, junto con estrategias de ingeniería que incorporen la modulación inmune localizada, como las células CAR-T que secretan scFv anti-PD-L1 para bloquear los puntos de control inmunitario. Para modelar mejor las respuestas terapéuticas, establecimos una plataforma dinámica de co-cultivo autóloga en tiempo real que integra organoides derivados del paciente con cáncer colorrectal (CRC) y células CAR-T para evaluar la infiltración, la persistencia y la citotoxicidad ex vivo. Aunque los ensayos clínicos iniciales de las células CAR-T dirigidas contra la mesotelina (MSLN) han demostrado una alta seguridad, su eficacia antitumoral sigue siendo modesta, lo que pone de manifiesto la necesidad de mejorar los constructos.

Por lo tanto, diseñamos células anti-MSLN-CAR4-T utilizando scFv anti-MSLN totalmente humano, unido a un andamiaje de coestimulación triple (CD28, 4-1BB y CD27) fusionado a CD3ζ, y células anti-MSLN-CAR5-T, incorporando un scFv anti-PD-L1 adicional. Tanto las células CAR4-T como las CAR5-T mostraron una eficacia citotóxica comparable contra los organoides autólogos MSLN alto/PD-L1 alto.

Sin embargo, solo las células anti-MSLN-CAR5-T fueron capaces de mantener una potente actividad citotóxica contra los organoides PD-L1 alto, con una alta producción de IFN-γ/citocinas citolíticas a una baja relación efector/diana (5:1), lo que refleja una mayor resistencia a la supresión mediada por PD-L1. Por último, nuestra plataforma ex vivo de 14 días de CRC-organoides/células CAR-T proporciona una herramienta rápida y prometedora para la validación de antígenos asociados al tumor, la simplificación del aislamiento de organoides, las pruebas de citotoxicidad autóloga de las células CAR-T y la optimización de la inmunoterapia personalizada en tumores sólidos.